从样本到结果：人基质裂解素ST1检测全流程介绍

人基质裂解素（Suppression of Tumorigenicity 1, ST1），又称ST14或matriptase，是一种丝氨酸蛋白酶，在细胞增殖、分化、组织修复及炎症反应中发挥关键调控作用。酶联免疫吸附测定（ELISA）因其高灵敏度与特异性，成为定量检测人ST1表达水平的常用方法。以下是使用人ST1 ELISA试剂盒的完整检测流程。

第一步：样本准备

常用的样本类型包括血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、细胞培养上清及组织匀浆。采集后应尽快离心去除杂质，分装保存于-80℃，避免反复冻融。检测前在冰上解冻，根据试剂盒说明进行适当稀释，以确保样本中ST1浓度处于标准曲线线性范围内。

第二步：试剂与设备准备

提前将试剂盒各组分（标准品、检测抗体、酶结合物等）平衡至室温（15–25℃）。准备好洗板机、酶标仪（检测波长通常为450 nm）、移液器及96孔微孔板（预包被ST1特异性捕获抗体）。

第三步：加样与孵育

将标准品和待测样本加入相应孔中，封板后37℃孵育1–2小时，使ST1蛋白与固相抗体充分结合。随后洗板去除未结合物质，加入生物素标记的检测抗体，再次孵育并洗涤。

第四步：显色与终止

加入酶结合物（如HRP-链霉亲和素），孵育后使用TMB显色液反应15–30分钟，再加入终止液终止反应，溶液由蓝变黄。

第五步：读数与分析

在酶标仪上测定各孔吸光度（OD值），以标准品浓度绘制标准曲线，根据样本OD值计算ST1的浓度。

整个流程约需3–4小时，操作简便、重复性好，为人ST1的科研与临床前研究提供了可靠的数据支持。